LiP-MS 有限蛋白酶解-质谱联用
LiP-MS 是结构蛋白质组学领域非标记、高通量、原位构象解析核心技术。通过蛋白酶 K 温和酶切与高分辨质谱定量，实现复杂体系中蛋白质构象动态与相互作用的精准表征。
- 不依赖化学修饰、无需蛋白纯化，原位保留生理构象
- 单次鉴定 ~3500 蛋白、~40000 肽段，覆盖度较传统结构方法提升 3–5 倍
- 构象响应检出限低至 nM 级，样本用量仅为标记法 1/10
- 重复性：生物学重复 R² > 0.95，技术重复 R² > 0.98
CETSA 细胞热位移分析
CETSA 基于配体结合改变蛋白质热稳定性的原理，在活细胞内直接检测靶点蛋白-配体相互作用。突破传统分子互作技术依赖纯化蛋白、脱离生理环境的局限。
- 经典 CETSA（Western Blot 检测）：适用于已知靶点验证
- MS-CETSA（全蛋白质组检测）：适用于未知靶点筛选与脱靶效应分析
- ΔTm > 2 ℃ 判定为特异性结合，支持浓度依赖性验证