技术原理
DSF（Differential Scanning Fluorimetry，差示扫描荧光法）通过监测蛋白质热变性过程中荧光信号的变化来评估蛋白质的稳定性。常用染料如 SYPRO Orange 在蛋白质变性后暴露的疏水区域发出荧光，从而记录熔解曲线。
核心应用
- 药物筛选：比较有无配体存在时的 Tm 变化（ΔTm），快速评估结合能力
- 条件优化：筛选最佳缓冲液 pH、盐浓度、添加剂
- 稳定性对比：比较不同突变体或修饰形式的稳定性差异
- 配方开发：评估不同制剂条件下蛋白的长期稳定性
技术优势
- 样品需求量极低（µL 级别）
- 高通量兼容（96/384 孔板格式）
- 实验速度快（通常 < 1 小时）
- 可与 CETSA 联用形成"体外+体内"双重验证